用70%的酒精是因为这个浓度对沉淀DNA效果最好,并且异丙醇能溶于酒精,去除异丙醇,然后挥发酒精,似乎还能除盐个人见解异丙醇沉淀以后不必用70%乙醇洗只有醋酸钠 乙醇沉淀之后才需要70%乙醇洗,目的是洗去加入的盐。
晚上好,DNA的结构由核苷酸组成但归根结底还是保留有脱氧核糖的戊糖结构,也就是说和葡萄糖蔗糖有相似性无水乙醇虽然和水一样属于极性溶剂但是它毕竟是兼容水形成氢键所以极性没有水分子强和氯化钠溴化钾硫酸铜这些离子晶体只溶于水而不溶于乙醇是相同道理,水合能非常高请酌情参考嘌呤。
而此时盐的阳离子会与DNA结合形成DNA阳离子盐溶于溶液中,再用无水乙醇可以将DNA阳离子盐沉淀下来,但这样一来,DNA中就含有较多的盐离子,这势必会影响下一步实验的进行,所以要用70%乙醇洗涤DNA沉淀因为在70%乙醇里DNA是不溶的,而盐离子却可溶,用无水乙醇则达不到这个目的!OK。
核酸不溶于乙醇,所以可以使用乙醇对核酸进行漂洗,使残留的杂质溶解于乙醇,并最终通过离心去除可总结为去除DNA中的残留杂质对混杂的RNA无效提取时,保证核酸一级结构的完整性核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子其他生物大分子如蛋白质多糖和脂类分子的污染应。
乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂DNA 溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混 合,其乙醇的最终含量占67%左右因而也可改用95%。
这里没发生化学反应,这个原理就是DNA在不同浓度下的NaCl溶液中溶解度不同,在某个浓度下析出酒精的原因是为了提纯,DNA不溶酒精,但实验材料中的一些杂质溶于酒精,所以就做到了初步提纯不是用酒精沉淀的,是在NaCl中沉淀出来的 你再仔细琢磨下这个实验,不懂的可以再问。
用70%的酒精是因为这个浓度对沉淀DNA效果最好,并且异丙醇能溶于酒精,去除异丙醇,然后挥发酒精,似乎还能除盐个人见解异丙醇沉淀以后不必用70%乙醇洗只有醋酸钠乙醇沉淀之后才需要70%乙醇洗,目的是洗去加入的盐。
DNA易溶于酒精,而DNA中的某些杂质不溶于酒精。
95%的乙醇是用来溶解其他的杂质,因为DNA不溶于酒精,所以过滤后就只把DNA滤掉,一部分能溶于酒精的杂质就留在酒精里了核酸酶在体外适宜的条件也可以降解DNA,因此提核酸要在低温下进行,尽量减少DNA的降解。
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