早上好,IPA不能溶解无机盐和有机盐,所以会沉淀析出,你换成甲醇或者乙醇就会轻得多,水浴加热到40度时甲醇和乙醇对无机盐和一部份有机盐的溶解度会大幅度上升重新变回无色清澈溶液的如果你用SDSSDBS或者FMES等阴离子表活来提取的话,IPA效果比甲乙醇是要好的,请参考一般情况下无机盐和有机类。

有害的,首先制胶中使用丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺具有神经毒性作用,人体吸收后可致基因突变裂解液含PMSF剧毒,严重损害呼吸道粘膜眼睛及皮肤过硫酸铵对皮肤粘膜有刺激性和腐蚀性甲醇有较强的毒性,对人体的神经系统和血液系统影响大DAB有较强的致癌性 这只是我自己的看法,呵呵;1当然是胶的浓度9kda的话要适当增大,1520%应该差不多吧如果实在不行还能考虑用gradient gel2二是转膜缓冲液,内要含20%甲醇,新鲜配制,反复使用的话注意甲醇会蒸发掉如果连续使用的话两三次应该还可以甲醇一是能够洗掉跑胶时泡透了的SDSSDS使蛋白带负电,方便移动,二是帮助。

脱色液50%的甲醇,7%的冰醋酸的水溶液。

蛋白质变性剂的作用是破坏蛋白质的次级键,如氢键盐键和疏水力,引起天然构象的解体它们并不破坏共价键,如肽键和二硫键,故不涉及一级结构的改变变性剂有溶解型和沉淀型两类,SDS尿素和胍盐是有效的溶解型变性剂,而三氯乙酸甲醇和氯仿异戊醇是有效的沉淀变性剂一般而言,变性剂应用时常大大。

反相系统吧用10%或者15%的甲醇水或者乙腈水,10mlmin冲洗1小时,然后在用甲醇或者乙腈封存色谱柱十二烷基硫酸,也就是SDS,是一种表面活性剂对色谱柱的伤害挺大的尽可能地多冲一会儿甲醇水,尽量把柱子里面残留的东西冲出来;甲醇引起的胶面皱缩,建议使用BioRad的BioSafe考染试剂,无需甲醇脱色,1小时完成染色脱色全过程,灵敏度达到8ng。